เลขที่คำขอ: 1101001083
8/01/2553
8/07/2554
118552
27/12/2555
75524
8/04/2563
เวคเตอร์การแสดงออก (expression vector) สูงในลักษณะแสดงออกได้เองที่มีความเสถียร สำหรับการเตรียมวัคซีน HPV และ แบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติกรีคอมบิแนนท์ซึ่งถูกแปลงพันธุ์โดยสิ่งนั้น
C12N 15/86 C12N 15/03
ไบโอลีดเดอร์ส คอร์ปอเรชั่น
ซุง, มูน-ฮี, พู, แฮร์ยัง, ลี, อิล ฮัน
นางดารานีย์ วัจนะวุฒิวงศ์, นางสาวสนธยา สังขพงศ์
แจ้งเตือนชำระค่าธรรมเนียมรายปี
DC60 (08/07/54)
การประดิษฐ์ปัจจุบันนี้เกี่ยวข้องกับเวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิว (surface expression vector)
สำหรับการเตรียมวัคซีน HPV ซึ่งเวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิว ประกอบด้วย ยีนที่เข้ารหัสโปรตีน
กลายพันธุ์ repE ที่มีลำดับการเรียงตัวของกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 1, โปรโมเตอร์,ยีนรวมโพลี-
แกมมา-กลูตาเมต ซินเทเตส (poly-gamma-glutamate synthetase complex gene) และ ยีนซึ่งถูกเชื่อมต่อ
กับยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ซินเทเตส และ เข้ารหัสโปรตีนแอนติเจนที่มีส่วนในการเหนี่ยวนำ
เนื้องอก (tumor induction-associated antigen protein) ของพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์ (human
papillomavirus)
การประดิษฐ์ปัจจุบันนี้ได้จัดให้มีเวคเตอร์การแสดงออกที่แสดงในลักษณะประกอบกัน
ถึงระดับที่สูงของโปรตีนแอนติเจนของพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์ (HVP) อีกทั้ง การประดิษฐ์ได้จัด
ให้มีแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติกรีคอมบิแนนท์, ซึ่งถูกแปลงพันธุ์ด้วยเวคเตอร์การแสดงออก และ
ที่แสดงโปรตีนแอนติเจน HVP บนพื้นผิวของมัน และ องค์ประกอบที่ประกอบด้วย แบคทีเรียที่ผลิต
กรดแลคติก รีคอมบิแนนท์ ซึ่งแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติกรีคอมบิแนนท์ และ องค์ประกอบนั้น
มีประสิทธิภาพในฐานะวัคซีนสำหรับการบำบัดโรคมะเร็งปากมดลูก เนื่องจากมันสามารถ
ประยุกต์ใช้ได้ทางปาก และโดยตรงกับช่องคลอด
------09/02/2561------(OCR)
หน้า 1 ของจำนวน 3 หน้า
ข้อถือสิทธิ
1. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิว (surface expression vector) สำหรับการเตรียมองค์ประกอบ
สร้างภูมิคุ้มกันพาพิลโลมาไวรัส (human papillomavirus; HPV) ของมนุษย์ซํ่งเวคเตอร์การแสดงออกที่
พื้นผิวนั้น ประกอบค์วยยีนที่เข้ารหัสโปรตีนกลายพันธุ repE ที่ประกอบค์วยลำดับการเรียงตัวของ
กรตอะมิโนของ SEQ ID NO: 1, แอลโดเลสโปรโมเตอร์ที่ได้จากแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก, ยีนรวม
โพลี-แกมมา-กลูตาเมต ชินเทเตส (poly-gamma-glutamate synthetase complex gene) สำหรับการ
แสดงออกที่พื้นผิวและยีนชื่งถูกเชื่อมต่อกับยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ชินเทเตสและถอดรหัส
โปรตีนแอนติเจนทีมีส่วนในการเหนียวนำเนื้องอก (tumor induction-associated antigen protein) ของ
พาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์
2. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่โปรตีนแอนติเจนที่มีส่วนในการ
เหนี่ยวนำเนื้องอกของ HPV คือ E7 หรือ E7 (Rb) ของ HPV
3. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต
ชินเทเตสภูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย pgsB, pgsC และ pgsA
4. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ชื่งถูกแปลงพันธุด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1
5. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิที่ 4 โดยที่จุลชีพนั้นคือแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก
6. องค์ประกอบสร้างภูมิคุ้มกันสำหรับการให้แก่ผู้ป่วยมะเร็งปากมดลูก ชื่งองค์ประกอบสร้าง
ภูมิคุ้มกันนั้นประกอบด้วยจุลชีพรีคอมบิแนนท์แปลงพันธุตามข้อถือสิทธิที่4ในฐานะส่วนผสม
ออกฤทชื่
7. วิธีการสำหรับการเตรียมจุลชีพที่มี HPV แอนติเจน ที่แสดงออกบนพื้นผิวของมัน
ชํ่งวิธีการนั้นประกอบด้วยขั้นตอนของ: การเพาะเลี้ยงจุลชีพรีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิที่ 4 เพื่อแสดง
HPV แอนติเจน บนพื้นผิวของจุลชีพนั้น; และ การเก็บรวบรวมจุลชีพรีคอมบิแนนท์ที่มี HPV แอนติเจน
ที่แสดงออกบนพื้นผิวของมัน
8. องค์ประกอบสร้างภูมิคุ้มกันสำหรับการบำบัดโรคมะเร็งปากมดลูก ซงองค์ประกอบสร้าง
ภูมิคุ้มกันนั้นประกอบด้วยจุลชีพรีคอมบิแนนท์ที่มี HPV แอนติเจนที่แสดงออกบนพื้นผิวของสิ่งนั้นซํ่ง
ลูกเตรียมขึ้นโดยวิธีการของข้อถือสิทธิที่ 7 ในฐานะส่วนผสมออกฤทขึ้
9. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 6 โดยที่องค์ประกอบสร้างภูมิคุ้มกันนั้นถูกให้ทางปาก
10. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวสำหรับการเตรียมวัคซีนพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์ซื่ง
เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวนั้น ประกอบด้วยยีนที่เข้ารหัสโปรตีนกลายพันธุ repE ที่มีลำดับการเรียง
ตัวของกรดอะมิโนของ SEQIDNO: 1, โปรโมเตอร์, ยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ชินเทเตสสำหรับ
หน้า 2 ของจำนวน 3 หน้า
การแสดงออกที่พื้นผิว และ ยีนซํ่งถูกเชื่อมต่อกับยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ซินเทเตส และ
ถอดรหัสโปรตีนแอนติเจนที่มีส่วนในการเหนี่ยวนำเนื้องอกของพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์
11. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่โปรตีนแอนติเจนที่มีส่วนในการ
เหนี่ยวนำเนื้องอกของ HPV คือ E7 หรือ E7 (Rb) ของ HPV
12. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่โปรโมเตอร์คือแอลโดเลส
โปรโมเตอร์ที่ได้จากแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก
13. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่ยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต
ชินเทเตสถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย pgsB, pgsC และ pgsA
14. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ซํ่งถูกแปลงพันธุด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 10
15. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิที่ 14 โดยที่จุลชีพนั้นคือแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก
16. วัคซีนสำหรับการบำบัดโรคมะเร็งปากมดลูก ซํ่งวัคซีนนั้นประกอบด้วยจุลชีพ
รีคอมบิแนนท์แปลงพันธุตามข้อถือสิทธิที่ 14หรือ 15 ในฐานะส่วนผสมออกฤทธิ้
17. วิธีการสำหรับการเตรียมจุลชีพที่มี HPV แอนติเจน ที่แสดงออกบนพื้นผิวของมัน
ซํ่งวิธีการนั้นประกอบด้วยขั้นตอนของ: การเพาะเลี้ยงจุลชีพรีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิที่ 14 เพื่อ
แสดง HPV แอนติเจน บนพื้นผิวของจุลชีพนั้น; และ การเก็บรวบรวมจุลชีพรีคอมบิแนนท์ที่มี HPV
แอนติเจนที่แสดงออกบนพื้นผิวของมัน
18. วัคซีนสำหรับการบำบัดโรคมะเร็งปากมดลูก ซื่งวัคซีนนั้นประกอบด้วยจุลชีพ
รีคอมบิแนนท์ที่มี HPV แอนติเจนที่แสดงออกบนพื้นผิวของสิ่งนั้นชื่งถูกเตรียมขึ้นโดยวิธีการของข้อ
ถือสิทธิที่ 17 ในฐานะส่วนผสมออกฤทธ
19. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 16 หรือ 18 โดยที่วัคซีนนั้นถูกให้ทางปาก
20. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวสำหรับการเตรียมวัคซีน HPV ซํ่งเวคเตอร์การแสดงออก
ที่พื้นผิวนั้นประกอบด้วยยีนที่เข้ารหัสโปรตีนกลายพันธุ repE ที่มีลำดับการเรียงตัวของกรดอะมิโนของ
SEQ ID NO: 1, แอลโดเลสโปรโมเตอร์ที่ได้จากแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก, ยีนรวมโพลี-แกมมา-
กลูตาเมต ชินเทเตสซงถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยpgsB.pgsCและpgsA สำหรับการแสดงออก
ที่พื้นผิว และ ยีนชื่งถูกเชื่อมต่อกับยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ชินเทเตส และ เข้ารหัสโปรตีน
แอนติเจนที่มีส่วนในการเหนี่ยวนำเนื้องอก E7 ของพาพิลโลมาไวรัสฃองมนุษย์
21. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวสำหรับการเตรียมวัคซีน HPV ชื่งเวคเตอร์การแสดงออก
ที่พื้นผิวนั้นประกอบด้วยยีนที่เข้ารหัสโปรตีนกลายพันธุ repE ที่มีลำดับการเรียงตัวของกรดอะมิโน
ของ SEQ ID NO: 1, แอลโดเลสโปรโมเตอร์ที่ได้จากแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก, ยีนรวมโพลี-แกมมา-
หน้า 3 ของจำนวน 3 หน้า
กลูตาเมต ชินเทเตสชื่งถูกเถือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยpgsB, pgsCและpgsA สำหรับการแสดงออก
ที่พื้นผิว และ ยีนซํ่งถูกเชื่อมต่อกับยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ชินเทเตส และ เข้ารหัสโปรตีน
แอนติเจนที่มีส่วนในการเหนี่ยวนำเนื้องอก E7(Rb) ของพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์
22. แบคทีเรยที่ผลิตกรดแลคติกรคอมบิแนนท์ชื่งถูกแปลงพันธุด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ
ที่ 20
23. แบคทีเรยที่ผลิตกรดแลคติกรคอมบิแนนท์ชื่งถูกแปลงพันธุด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ
ที่ 21
------------
1.เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิว (surface expression vector) สำหรับการเตรียมวัคซีนพาพิล
โลมาไวรัส (human papillomavirus; HPV) ของมนุษย์ ซึ่งเวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวนั้น
ประกอบด้วยยีนที่เข้ารหัสโปรตีนกลายพันธุ์ repE ที่มีลำดับการเรียงตัวขยองกรดอะมิโนของ SEQ ID
NO: 1, โปรโมเตอร์, ยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ซินเทเตส (poly-gamma-glutamate synthetase
complex gene) สำหรับการแสดงออกที่พื้นผิว และ ยีน ซึ่งถูกเชื่อมต่อกับยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต
ซินเทเตส และ ถอดรหัวโปรตีนแอนติเจนที่มีส่วนในการเหนี่ยวนำเนื้องอก (turmor induction-
associated antigen protein)ของพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์
2. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่โปรตีนแอนติเจนที่มีส่วนในการ
เหนี่ยวนำเนื้องอกของ HPV คือ E7 หรือ E7 (Rb) ของ HPV
3. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่โปรโมเตอร์คือแอลโดเลสโปรโม
เตอร์ที่ได้จากแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก
4. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต
ซินเทเตสถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย pgsB, pgsC และ pgsA
5. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ซึ่งถูกแปลงพันธุ์ด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1
6. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิที่ 5 โดยที่จุลชีพนั้นคือแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก
7. วัคชีนสำหรับการบำบัดโรคมะเร็งปากมดลูก ซึ่งวัคซีนนั้นประกอบด้วยจุลชีพรีคอมบิแนนท์
แปลงพันธุ์ตามข้อถือสิทธิที่ 5 หรือ 6 ในฐานะส่วนผสมออกฤทธิ์
8. วิธีการสำหรับการเตรียมจุลชีพที่มี HPV แอนติเจน ที่แสดงออกบนพื้นผิวของมัน
ซึ่งวิธีการนั้นประกอบด้วยขั้นตอนของ: การเพาะเลี้ยงจุลชีพรีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิที่ 5 เพื่อแสดง
HPV แอนติเจน บนพื้นผิวของจุลชีพนั้น: และ การเก็บรวบรวมจุลชีพรีคอมบิแนนท์ที่มี HPV แอนติเจน
ที่แสดงออกบนพื้นผิวของมัน
9. วัคซีนสำหรับการบำบัดโรคมะเร็งปากกมดลูก ซึ่งวัคซีนนั้นประกอบด้วยจุลชีพรีคอมบิแนนท์
ที่มี HPV แอนติเจนที่แสดงออกบนพื้นผิวของสิ่งนั้นซึ่งถูกเตรียมขึ้นโดยวิธีการของข้อถือสิทธิที่ 8
ในฐานะส่วนผสมออกฤทธิ์
10. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 7 หรือ 9 โดยที่วัคซีนนั้นถูกให้ทางปาก
11. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวสำหรับการเตรียมวัคซีน HPV ซึ่งเวคเตอร์การแสดงออก
ที่พื้นผิวนั้นประกอบด้วยยีนที่เข้ารหัสโปรตีนกลายพันธุ์ repE ที่มีลำดับการเรียงตัวของกรดอะมิโนของ
SEQ ID NO: 1, แอลโคเลสโปรโมเตอร์ที่ได้จากแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก, ยีนรวมโพลี-แกมมา-
กลูตาเมต ซินเทเตสซึ่งถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย pgsB, pgsC และ pgsA สำหรับการแสดงออก
ที่พื้นผิว และ ยีนซึ่งถูกเชื่อมต่อกับยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ซินเทเตส และ เข้ารหัสโปรตีน
แอนติเจนที่มีส่วนในการเหนี่ยวนำเนื้องอก E7 ของพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์
12. เวคเตอร์การแสดงออกที่พื้นผิวสำหรับการเตรียมวัคซีน HPV ซึ่งเวคเตอร์การแสดงออก
ที่พื้นผิวนั้นประกอบด้วยยีนที่เข้ารหัสโปรตีนกลายพันธุ์ repE ที่มีลำดับการเรียงตัวของกรดอะมิโน
ของ SEQ ID NO: 1, แอลโดเลสโปรโมเตอร์ที่ได้จากแบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติก, ยีนรวมโพลี-แกมมา-
กลูตาเมต ซินเทเตสซึ่งถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย pgsB, pgsC และ pgsA สำหรับการแสดงออก
ที่พื้นผิว และ ยีนซึ่งถูกเชื่อมต่อกับยีนรวมโพลี-แกมมา-กลูตาเมต ซินเทเตส และ เข้ารหัสโปรตีน
แอนติเจนที่มีส่วนในการเหนี่ยวนำเนื้องอก E7(Rb) ของพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์
13. แบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติกรีคอมบิแนนท์ซึ่งถูกแปลงพันธุ์ด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ
ที่ 11
14. แบคทีเรียที่ผลิตกรดแลคติกรีคอมบิแนนท์ซึ่งถูกแปลงพันธุ์ด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ
ที่ 12